DPPH清除自由基抗氧化活性实验

DPPH清除自由基抗氧化活性实验

清除DPPH自由基能力的测定称取一定量DPPH，用无水乙醇配制为0.04mg/mL溶液。取2mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）溶液加入2mL DPPH溶液，混合均匀后在室温下静置30min。离心10min后取上清液在517nm处测定吸光值。以维生素C为阳性对照。样品对DPPH自由基清除率的计算公式为：清除率 = [1 - (A1 / A0)] × 100%总还原能力的测定在10mL离心管中加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸缓冲液2.5mL，不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的样品溶液1mL，再加入2.5mL 1%铁氰化钾。混合均匀后于50℃反应20min，取出后加入2.5mL 10%三氯乙酸终止反应，离心10min。取上清液在700nm处检测吸光值，以维生素C为阳性对照。对Fe2+离子螯合能力的测定分别取不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的样品溶液1mL、3.7mL蒸馏水，加入0.1mL 2mmol/L的FeCl2溶液和0.2mL 5mmol/L的菲洛嗪溶液，于25℃水浴10min后在562nm处测吸光值。以EDTA为阳性对照。样品对Fe2+的螯合率计算公式为：螯合率 = [(A0 - A1) / A0] × 100%以上实验方法用于评估DPPH清除自由基、总还原能力和对Fe2+离子螯合能力的抗氧化活性。